TY - JOUR A1 - Kelly, Paul P. A1 - Eichler, Anja A1 - Herter, Susanne A1 - Kranz, David C. A1 - Turner, Nicholas J. A1 - Flitsch, Sabine L. T1 - Active site diversification of P450cam with indole generates catalysts for benzylic oxidation reactions JF - Beilstein Journal of Organic Chemistry PY - 2015/// VL - 11 SP - 1713 EP - 1720 SN - 1860-5397 DO - 10.3762/bjoc.11.186 PB - Beilstein-Institut JA - Beilstein J. Org. Chem. UR - https://doi.org/10.3762/bjoc.11.186 KW - active site mutagenesis KW - biotransformation KW - C–H activation KW - cytochrome P450cam monooxygenase KW - hydroxylation N2 - Cytochrome P450 monooxygenases are useful biocatalysts for C–H activation, and there is a need to expand the range of these enzymes beyond what is naturally available. A panel of 93 variants of active self-sufficient P450cam[Tyr96Phe]-RhFRed fusion enzymes with a broad diversity in active site amino acids was developed by screening a large mutant library of 16,500 clones using a simple, highly sensitive colony-based colorimetric screen against indole. These mutants showed distinct fingerprints of activity not only when screened in oxidations of substituted indoles but also for unrelated oxidations such as benzylic hydroxylations. ER - TY - JOUR AU - Breuer, M. AU - Ditrich, T. AU - Habicher, T. AU - Hauer, B. AU - Keßeler, M. AU - Stürmer, R. AU - Zelinski, T. JF - Angew. Chem., Int. Ed. PY - 2004/// VL - 43 SP - 788 EP - 824 DO - 10.1002/anie.200300599 ER - TY - JOUR AU - Schulz, S. AU - Girhard, M. AU - Urlacher, V. B. JF - ChemCatChem PY - 2012/// VL - 4 SP - 1889 EP - 1895 DO - 10.1002/cctc.201200533 ER - TY - JOUR AU - Filipovic, D. AU - Paulsen, M. D. AU - Loida, P. J. AU - Sligar, S. G. AU - Ornstein, R. L. JF - Biochem. Biophys. Res. Commun. 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